人白血病细胞株中G_(sα)转录物的新型异常剪接

摘要

Gsα是与激活腺苷酸环化酶信号转导途径相关的蛋白质 .不同的Gsα mRNA是由不同形式的剪接或利用不同的启动子产生的 .报道人白血病细胞株中Gsα转录物的一种新型异常剪接 .以来自Jurkat细胞株的人白血病文库cDNA及人白血病细胞株HL_6 0mRNA反转录后的cDNA第一链为模板 ,PCR扩增出Gsα基因完整编码区 (命名为GsαLeu) .DNA序列分析表明 ,GsαLeu与正常Gsα相比有 2个区域发生不改变阅读框架的缺失 ,一个位于正常Gsα第 2 3个氨基酸与第 2 49个氨基酸之间 ,另一个位于第 2 5 4个氨基酸与第 2 6 0个氨基酸之间 ,GsαLeu的这种结构提示其在白血病中起着重要的作用 .将GsαLeu完整编码区插入pGEX_2T融合蛋白表达载体的凝血酶位点下游 ,高效表达了GST/GsαLeu融合蛋白 ,表达产物经亲和层析 ,一步获得了电泳纯的GST/GsαLeu,为进一步研究GsαLeu的功能打下了基础 .