上调胰岛素样生长因子结合蛋白相关蛋白1对子宫内膜癌细胞系HEC-1A生物学功能的影响

摘要

目的:探讨上调子宫内膜癌细胞系HEC-1A中胰岛素样生长因子结合蛋白相关蛋白1的表达对子宫内膜癌细胞系HEC-1A增殖,凋亡及细胞周期的影响。方法:采用脂质体介导重组质粒转染HEC-1A细胞,按不同处理分为实验组(转染pEX-2-IGFBP7)、阴性对照组(转染pEX-2-Empty)、空白对照组(只加转染试剂),应用qRT-PCR技术检测各组细胞中IGFBP-rP1mRNA的表达水平,利用蛋白印迹法(Western Blot)测定各组IGFBP-rP1蛋白表达。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测各组细胞系增殖抑制率,采用流式细胞仪检测各组凋亡率及细胞周期变化。结果:实验组、阴性对照组和空白对照组HEC-1A细胞中IGFBP-rP1mRNA的相对拷贝量分别为2.699±0.293,1.296±0.169,1.031±0.301,实验组明显高于阴性对照组(P=0.001)及空白对照组(P=0.000)。实验组IGFBP-rP1蛋白相对表达量(1.126±0.074)与阴性对照组(0.889±0.040,P=0.006)及空白对照组(0.884±0.043,P=0.005)中相比,差异有统计学意义。实验组24、48和72 h增殖抑制率(0.373±0.054,0.399±0.047,0.380±0.053)与阴性对照组(0.036±0.006,0.040±0.005,0.0334±0.006)和空白对照组(0.027±0.003,0.032±0.002,0.024±0.002)相比,差异均有统计学意义(P0.05)。转染后24 h,实验组凋亡率为(20.667±2.055)%,与阴性对照组[(3.967±0.351)%]和空白对照组[(4.967±0.252)%]相比,差异有统计学意义(P<0.01);实验组S+G2/M期细胞的比例为(30.980±1.461)%,明显低于阴性对照组[(38.797%±2.419)%]和空白对照组[(37.800%±0.350)%],差异有统计学意义(P<0.01)。结论:上调人子宫内膜癌细胞HEC-1A中IGFBP-rP1的表达可以抑制该细胞系的增殖,促进其凋亡,阻滞细胞周期。