人工光环境对雌性豚鼠生殖内分泌的影响及日钟阴阳方的干预作用

摘要

目的研究人工光环境对雌性豚鼠生殖内分泌的影响及日钟阴阳方对雌性豚鼠下丘脑中吻素Kisspeptin及吻素受体(KISS1R)的作用机制。方法将3月龄雌性豚鼠按体重的大小从1到36编号,获取随机数字,按余数分为6组,分别为自然光组、自然光食疗组、LED灯组、LED灯食疗组、荧光灯组和荧光灯食疗组,每组6只。用日钟阴阳方对自然光食疗组、LED灯食疗组、荧光灯食疗组进行干预12周。饲养12周后,于动情前期取材,HE染色,电镜下观察卵巢形态;ELISA测定豚鼠血清中雌二醇(E2)、促黄体生成素(LH)、促卵泡生成素(FSH)、睾酮(T)、抗苗勒氏管激素(AMH)、泌乳素(PRL)水平;Western Blot测定豚鼠卵巢内雄激素受体(AR)、促黄体生成素受体(LHR)、促卵泡生成素受体(FSHR)及下丘脑中KISS1R的蛋白含量及逆转录聚合酶链式反应法(RT-PCR)测定豚鼠卵巢内AR、LHR、FSHR mRNA及下丘脑中KISS1R mRNA表达水平。结果(1)自然光照组及自然光食疗组可见结构完整的卵母细胞,未见明显病理变化;荧光灯组及LED灯组卵巢卵母细胞消失,见大量炎性细胞浸润;荧光灯食疗组及LED灯食疗组卵巢可见卵母细胞,但卵母细胞周围粒细胞排列疏松,间隙增大。(2)与自然光照组比较,自然光食疗组血清E2、LH、FSH、T、AMH、PRL含量下降,下丘脑内KISS1R及卵巢内LHR、FSHR、AR蛋白含量下降(P<0.05);与荧光灯组比较,荧光灯食疗组血清血清E2、LH、FSH、T、AMH、PRL含量下降,下丘脑内KISS1R及卵巢内LHR、FSHR、AR蛋白含量下降(P<0.05);与LED灯组比较,LED灯食疗组血清E2、LH、FSH、T、AMH、PRL含量均下降,下丘脑内KISS1R及卵巢内LHR、FSHR、AR蛋白含量下降(P<0.05);与自然光照组比较,荧光灯、LED灯组血清E2、LH、FSH、T、AMH、PRL含量上升,下丘脑内KISS1R及卵巢内LHR、FSHR、AR蛋白含量上升(P<0.05);与自然光食疗组比较,荧光灯食疗、LED灯食疗组血清E2、LH、FSH、T、AMH、PRL含量上升,下丘脑内KISS1R及卵巢内LHR、FSHR、AR蛋白含量上升(P<0.05)。结论人工光环境的改变会对豚鼠生殖内分泌造成影响,日钟阴阳方可有效改善豚鼠生殖内分泌紊乱的结局。其可能机制与通过调控豚鼠下丘脑内KISS1R的表达,影响Kisspeptin的分泌有关。