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基因转录后沉默信号可以在拟南芥嫁接体内快速双向传递

         

摘要

RNA干扰(RNAi)是引起生物体基因转录后沉默的新技术之一,已成功用于基因功能研究.利用拟南芥动蛋白异型体KatB和KatC两个基因上共有的一段同源编码序列(168bp)构建了能导致目标基因KatB和KatC双基因转录后沉默的DEX(dexamethazone)诱导性RNAi载体.RT-PCR和Northernblot结果显示,转基因拟南芥纯合体植株(简称RNAi型植株)经DEX诱导后,KatB和KatC的mRNA逐渐减少,表明这两个基因发生了转录后沉默作用.用改进后的简易方法将RNAi型与野生型拟南芥植株进行高效率嫁接,对砧木和接穗中目标基因mRNA变化进行了半定量RT-PCR检测.结果表明,无论用RNAi型植株作为砧木或接穗,DEX诱导产生的基因沉默信号均能导致相应野生型接穗或砧木中KatB和KatCmRNA的减少,说明基因转录后沉默信号可以通过嫁接面在拟南芥体内双向传递;与已报道的基因沉默信号在烟草嫁接体内传递速度相比,拟南芥基因沉默信号的传递更为迅速.

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