转pMThGH基因红鲤F_4代鱼体内转植基因存在的分子多态性

摘要

从一尾转ｐＭＴｈＧＨ基因红鲤Ｆ４代仔鱼基因组内回收并克隆了５０个转植基因（ｔｒａｎｓｇｅｎｅ），对其中３３个进行了分析．根据双酶切结果，可将这些回收基因分为４种类型．用５种内切酶构建了这 ４种类型回收基因的限制性内切酶图谱，第 １种类型（６个，占 １８％）与建立原代转基因鱼所用的外源基因相同，而其他３种类型回收基因的分子量大小、酶切位点的种类、数量、位置都迥异于转移前的结构，意味着大多数转植基因顺序发生了缺失和重排．Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交进一步证明了这一结果．对回收基因侧翼进行顺序分析，鉴别了两个相关的整合位点，即鲤鱼β－ａｃｔｉｎ基因的启动子或５’ ＵＴＲ位点，以及与小鼠 ＲＴＫ ｍＲＮＡ同源的鲤鱼基因顺序位点。