甲基化调控的长链非编码RNA-GAS5对肝星状细胞增殖及活化的影响

摘要

目的研究长链非编码RNA-生长抑制特异性基因5(growth arrest-specific transcript 5,GAS5)对肝星状细胞增殖及活化影响,同时研究其启动子区域是否存在甲基化。方法实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测TGF-β1或5-Aza处理后的肝星状细胞中GAS5的表达;MTT、qRT-PCR及Western blot技术检测GAS5沉默后的细胞增殖及活化状态;BSP及TA克隆检测GAS5启动子区Cp G甲基化状态。结果与正常组比较,TGF-β1处理组和GAS5基因沉默组中GAS5表达均显著下调。在GAS5基因沉默后,肝星状细胞增殖率上调,且Ⅰ型胶原及α-SMA的mRNA和蛋白均显著增加。GAS5表达在5-Aza治疗后呈现时间依赖性上调。BSP及TA克隆检测显示5-Aza能有效地抑制GAS5甲基化水平。结论肝星状细胞活化时,GAS5表达的下调与其启动子甲基化密切相关;同时低表达的GAS5会促进肝纤维化进程的发展。