椪柑二倍体种间杂交胚抢救及后代倍性鉴定

摘要

中国拥有丰富优质的地方柑橘良种,但由于种籽数较多,商品性不好。无核育种是地方柑橘品种改良的主要目标,主要通过二倍体和四倍体杂交获得三倍体。但柑橘四倍体品种有限,有报道表明柑橘二倍体和二倍体杂交可以获得三倍体,不仅节约培育四倍体的时间,还可以缩短育种周期。本研究利用胚抢救体系辅助流式细胞仪检测和SSR分子标记鉴定技术,提高柑橘二倍体和二倍体杂交后代获得多倍体的概率,为探究二倍体和二倍体大规模杂交获得多倍体提供技术支持。本研究采用3个柑橘二倍体花粉与湖南地方品种‘椪柑8306’进行种间杂交,利用未成熟的种子进行胚抢救获得再生植株,经流式细胞仪和气孔电镜检测鉴定植株倍性,利用SSR标记鉴定杂交后代基因型。结果显示,通过胚抢救技术对杂交后100 d的幼果中未成熟种子进行培养,共获得405株植株。移栽存活70株,通过流式细胞仪检测和电镜检测,发现获得多倍体13株,其中四倍体1株,三倍体12株,多倍体的诱导率达到18.57%。通过SSR分子标记和毛细管电泳检测,发现多倍体均为同源多倍体,且引物4可以很好地对亲本和子代的特异性进行区分。本研究建立柑橘二倍体和二倍体杂交获得多倍体的胚抢救技术体系和多倍体的早期鉴定体系,获得了一批多倍体新种质,这一技术体系对柑橘多倍体资源的育种具有重要意义。