上海地区犬细小病毒病流行情况调查与病毒的分离鉴定

摘要

为了解犬细小病毒病在上海地区各类犬中的流行与病毒遗传变异情况,在全市范围内对流浪犬和家养犬进行了犬细小病毒的集中监测。分别采集家养犬和流浪犬粪便样品121份与675份,通过荧光定量PCR检测病毒DNA,阳性率分别为9.10%和34.52%。将阳性病料处理后接种至猫肾传代细胞(F81),成功分离到4株犬细小病毒,对4株犬细小病毒的VP2基因测序,并结合GenBank中的相关序列进行遗传演化分析,确定了这4株犬细小病毒分别属于2c和2b亚型。选取了2c亚型犬细小病毒对其进行持续传代,至其细胞病变与病毒增殖效率逐渐稳定,将其纯化后测定TCID50,通过电镜对病毒形态进行观察。结果表明,纯化后的病毒在电镜下观察呈现二十面体立体对称,无囊膜,直径20 nm左右,为典型细小病毒样粒子,病毒滴度为107.0 TCID50/mL。本研究结果为上海地区犬细小病毒病防控提供了依据。