miR-124和miR-520b下调Eps8表达并抑制HeLa细胞增殖

摘要

Eps8是一个多功能的信号分子,参与肌动蛋白重排、受体内吞和肿瘤的发生发展.为了寻找靶向Eps8的microRNAs(miRNAs)并研究其在宫颈癌中的调控作用,本文采用软件预测获得4个可能调控Eps8表达的miRNAs.利用双荧光素酶报告系统和Western印迹研究发现,miR-124和miR-520b结合到人EPS8 mRNA的3'非翻译区(untranslated region,UTR)并有效抑制Eps8蛋白的表达.进一步细胞存活检测、MTT法和克隆形成实验分析显示,miR-124和miR-520b过表达显著抑制HeLa细胞的生长和增殖.而且,miRNA调节的Eps8下调能提高HeLa细胞对化疗药物顺铂的敏感性.同时证明,miR-124和miR-520b激活肿瘤抑制基因p53与下游基因p21报告基因转录活性,也相应地上调了p53与p21的蛋白表达.这些结果提示,miR-124和miR-520b下调癌基因EPS8表达,从而抑制HeLa细胞增殖,负调控宫颈癌细胞生长.