水稻中一个25 kD Bowman-Birk蛋白酶抑制剂的表达和抑制活性分析

摘要

水稻Bowman-Birk蛋白酶抑制剂(RBBI)在体外是胰蛋白酶抑制剂,有的有1个同源结构域(8kD),有的有2个同源结构域(16kD).本研究发现,在水稻体内存在带有3个同源结构域的RBBI(25kD),而且RBBI受发育和伤害调控.体外实验发现,3:13二硫键(而不是4:5二硫键)可抑制胰蛋白酶的活性;而RBBI3-1的D3结构域对胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、木瓜蛋白酶和枯草芽孢杆菌素没有抑制活性.突变实验表明,改变D1结构域N端的P1位点(把Lys突变为Leu)并不能获得对胰凝乳蛋白酶的抑制活性,这表明RBBI3-1的D1结构域反应回环阻碍了P1位点获得新的抑制活性;而对胰凝乳蛋白酶的抑制活性可能还需要其他结构(比如3:13二硫键)的参与.