黄芪多糖对MC-3T3-E1成骨细胞CYP27B,CYP24A mRNA及蛋白表达的影响

摘要

目的：通过研究黄芪多糖对成骨细胞增殖及1α羟化酶（CYP27B）,24-羟基化酶（CYP24A）基因与蛋白表达情况的影响对其治疗骨质疏松症（OP）作用机制进行初步探讨。方法：以MC-3T3-E1成骨细胞为研究对象,实验分为5组,分别为正常组,维生素D组（1×10-5mmol·L-1）,黄芪多糖高、中、低剂量组（10,1,0.1 mg·L（-1））。用噻唑蓝（MTT）比色法检测不同浓度的黄芪多糖在不同时间（24,36,48 h）对MC-3T3-E1成骨细胞增殖率的影响。实时荧光定量聚合酶链式反应法（Real-time PCR）检测黄芪多糖对MC-3T3-E1成骨细胞CYP24A,CYP27B mRNA的表达情况;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测黄芪多糖对MC-3T3-E1成骨细胞CYP24A,CYP27B蛋白的表达情况。结果：MTT比色法显示黄芪多糖的质量浓度在0.1,1,10 mg·L（-1）时可以提高MC-3T3-E1成骨细胞的增殖率,且在48 h促增殖作用最佳。Real-time PCR,Western blot检测结果显示,与正常组比较,维生素D组MC-3T3-E1成骨细胞CYP27B mRNA表达量、蛋白表达量有显著促进作用（P〈0.05）;与维生素D组比较,黄芪多糖在质量浓度为10,1,0.1 mg·L（-1）时对MC-3T3-E1成骨细胞CYP24A mRNA表达量、蛋白表达量有显著抑制作用（P〈0.05）。结论：黄芪多糖能够治疗骨质疏松症其机制与提高成骨细胞活性及调节MC-3T3-E1成骨细胞CYP24A,CYP27B mRNA及蛋白表达水平有关。