牙龈卟啉单胞菌脂多糖对人脐静脉内皮细胞超微结构及细胞间黏附分子1表达的影响

摘要

目的通过观察牙龈卟啉单胞菌脂多糖(PgLPS)对人脐静脉内皮细胞(EA.hy926)的影响,探讨PgLPS在动脉粥样硬化(AS)的发生发展过程中可能发挥的作用。方法本文以EA.hy926细胞为研究对象,随机提取2~4代增殖旺盛的细胞进行实验(n=5),用不同浓度(0.01、0.1、1、10 mg/L)PgLPS刺激EA.hy926细胞,用细胞增殖检测试剂盒(CCK8)检测PgLPS对其细胞增殖影响,用透射电镜观察PgLPS对其细胞结构变化的影响,用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测细胞上清可溶型细胞间黏附分子1(sICAM-1),以及用Western-blot法检测细胞膜结合型细胞间黏附分子1(mICAM-1)的表达。结果当PgLPS浓度达到1 mg/L时,作用时间为24 h以上即可抑制EA.hy926细胞增殖(P<0.05);PgLPS浓度达到0.1 mg时透射电子显微镜可观察出现符合内皮细胞焦亡的改变;低浓度和高浓度PgLPS均能促进内皮细胞sICAM-1的表达增加(P<0.01),其中0.1 mg/L组sICAM-1表达水平最高,且上清液中的sICAM-1浓度随着PgLPS作用时间的延长而递增;Western-blot法检测结果显示PgLPS浓度达到1、10 mg/L时内皮细胞mICAM-1的相对表达量明显下降;在PgLPS浓度为10 mg/L时,不同的刺激时间作用下,各组mICAM-1的表达差异无统计学意义。结论PgLPS可以抑制人脐静脉内皮细胞增殖,使其发生焦亡的形态学改变,促进其sICAM-1的表达。