促红细胞生成素光激化学发光定量检测方法的建立及评价

摘要

采用棋盘滴定法，用针对EPO抗原的一个单克隆抗体及两个多克隆抗体，分别包被发光微球，与生物素化EPO配对组成反应体系，筛选出最佳抗体，进而确定最佳反应浓度，建立竞争模式的光激化学发光检测EPO的方法，绘制标准曲线并评价该方法。研究中采用SPSS19．0软件和ELISACalc进行统计分析。该法检测的敏感性为0．03ng／ml，在0．03-30ng／ml范围内线性良好。批内变异系数和天批间变异系数分别为3．66％和4．13％，EPO浓度高达30ng／ml时无Hook效应。51例EPO增高及51例健康体检者EPO的测定结果与放射免疫法检测EPO比较具有良好的相关性（r=0．913），建立的参考范围为0．77-4．88ng／ml。成功建立的竞争模式的光激化学发光定量检测EPO的方法，在EPO检测中具有极好的应用前景，有助于EPO诊断试剂盒的研制。