靶向EPAS1的siRNA抑制卵巢癌血管生成的体外研究

摘要

目的:通过RNA干扰技术抑制缺氧诱导因子2(EPAS1)的表达,抑制肿瘤新生血管形成来治疗卵巢癌。方法:人卵巢癌细胞株SKOV3分为实验组、阴性对照组和空白对照组。实验组和阴性组分别转染rAAV2-EPAS1-siRNA和rAAV2-EGFP,空白组不转染病毒。予常氧培养和缺氧培养。RT-PCR和Western blot检测EPAS1和血管内皮生长因子(VEGF)基因表达,ELISA检测分泌型VEGF水平,CCK-8检测细胞增殖能力,鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)试验检测血管形成。结果:阴性组和空白组SKOV3细胞EPAS1和VEGF基因在缺氧状态下表达增强,而实验组EPAS1和VEGF基因无论在常氧还是缺氧状态下表达都受到抑制,且分泌型VEGF水平下降,阴性组和空白组CAM有大量新生血管形成,而实验组CAM血管变化不明显,同时实验组细胞增殖能力下降,细胞生长曲线低平。结论:siRNA沉默EPAS1基因,能下调VEGF基因表达,抑制肿瘤血管生成和卵巢癌生长。