三元基序家族蛋白15敲低诱导肝癌细胞周期阻滞

摘要

三元基序家族蛋白15(tripartite motif-containing protein 15,TRIM15)是TRIM家族成员,该家族是一类具有E3泛素连接酶活性的蛋白质。TRIM15在肿瘤中的功能鲜有报导。本研究意在阐释TRIM15在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的作用。核质分离和免疫荧光实验确定TRIM15定位于细胞核和细胞质中;设计发夹RNA(shRNA)在肝癌细胞系中对TRIM15进行敲低;敲低TRIM 15后,细胞生长曲线测定和克隆形成结果显示,细胞增殖受到显著抑制(P<0.05);流式细胞术检测细胞周期显示,敲低TRIM 15使细胞阻滞在G_(0)/G_(1)期(P<0.05);而Western印迹检测在敲低TRIM 15后,细胞周期蛋白A(cyclin A)、周期蛋白依赖性蛋白激酶2(cyclin-dependent kinase 2,CDK2)、Rb、P-Rb、E2F转录因子1(E2F transcription factor 1,E2F1)表达下调,而CDK抑制因子(cyclin-dependent kinase inhibitor,CKI)p16、p21、p27表达显著上调。这些研究结果均证明,TRIM 15敲低诱导肝癌细胞周期阻滞,这表明,TRIM15可作为可行的治疗肝细胞癌的靶点。