低浓度多聚甲醛固定对蛋白质免疫印迹技术的改良

摘要

蛋白质免疫印迹(protein immunoblot,或Western blot)是一种广泛应用于检测细胞或组织蛋白质表达及蛋白质翻译后修饰的方法.前期的研究发现,使用低浓度(0.4%)多聚甲醛在蛋白质免疫印迹封闭环节前做膜固定,有助于提高蛋白质的检测效果.本文通过设置多聚甲醛的不同浓度和固定时间,进一步探索其在蛋白质免疫印迹技术中的应用.结果发现,低浓度(≤0.4%)多聚甲醛处理30 min,能明显提升蛋白质的检测效率.通过检测不同大小蛋白质的固定效果发现,大分子量的蛋白质使用多聚甲醛固定效果不明显,中等分子量和小分子量的蛋白质的固定效果较佳.综上研究表明,在中等或小分子量的蛋白质免疫印迹检测中,封闭环节前加入低浓度多聚甲醛固定,可以提高蛋白质的检测效果.