麻痹性贝类毒素细胞检测法的建立

摘要

目的：麻痹性贝类毒素的N-2a细胞检测方法的建立并确定可能的检测限值。方法：使用不同浓度毒素标准品结合藜芦定和乌本苷共同作用对数生长期的N-2a细胞,通过cck-8试剂盒检测细胞毒性,确立细胞检测方法的检出限及比较各毒素作用大小,并同步利用小鼠生物法进行验证,通过精确记录小鼠死亡时间,比较各毒素的毒作用大小。结果：麻痹性贝类毒素能明显降低藜芦定和乌本苷的细胞毒性,且具有剂量-反应关系,通过比较得出毒素各成分毒性大小为：neoSTX〉STX〉dcSTX〉GTX1,4〉GTX2,3〉dcGTX2,3;小鼠生物法的毒作用平均死亡时间为：neoSTX组（6.5 min）,GTX1,4组（8.0 min）,STX组（9.0 min）,dcSTX组（15 min）;GTX2,3组和dcGTX2,3组未见动物死亡。结论：细胞检测与小鼠生物法具有较好的一致性,表明所建立的细胞检测法可行,且细胞毒性试验检测方法具有较高的灵敏度,最低检出限值可达到10-9mol/L剂量水平,其中浓度在10-6~10-8mol/L间具有较好的线性。