组成型表达绿色荧光蛋白的重组干酪乳杆菌的构建

摘要

以干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)组成型表达质粒p PG-T7g10-PPαT为重组载体,在限制性内切酶SacⅠ和ApaⅠ酶切位点之间,插入增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因,构建重组质粒p PG-T7g10-EGFP,电转化干酪乳杆菌ATCC393(L.casei 393),获得重组菌p PG-T7g10-EGFP/L.casei 393;利用Western blot检测可见约27 ku的重组蛋白特异性反应带;激光共聚焦显微镜下可见重组菌出现特异的绿色荧光;流式细胞术分析可见重组菌出现了明显的荧光信号。结果表明:已经获得组成型表达EGFP的重组干酪乳杆菌。本研究为进一步利用该表达系统表达功能蛋白,拓展乳酸菌的应用提供了参考。