水飞蓟宾对γδT细胞杀伤胃癌细胞SGC-7901的影响及其机制初探

摘要

探讨水飞蓟宾对人γδT细胞杀伤胃癌细胞SGC-7901的影响及其作用机制。分离健康志愿者外周血单个核细胞，体外经多种细胞因子诱导培养为76T细胞；收集培养、扩增7d后的怕T细胞，将其用不同浓度的水飞蓟宾诱导24h、48h及72h，CCK-8法检测76T细胞增殖情况；流式细胞术（FCM）检测78T穿孔素（perforin，PFP）、细胞颗粒酶B（GranzymeB，GranB）及CD107a的表达；western-blot法检测78T细胞P—ERK1／2、Bcl-2、P—AKT、β-catenin的表达；乳酸脱氢酶（LDH）法检测γδT细胞对胃癌细胞SGC-7901的杀伤活性。结果发现浓度在1．6～100μg／ml的水飞蓟宾作用78T细胞72h后，76T细胞增殖率较对照组显著增加（P〈0．05），且在25μg／ml时达到最高峰；将6．25～100μg／ml水飞蓟宾诱导γδT细胞72h后，78T细胞的PFP、GranB及CD107a的表达以及P—ERK1／2、Bcl-2、P—AKT、β-catenin的表达与对照组比较均不同程度增加（P〈0．05），且对胃癌细胞SGC-7901的杀伤活性显著增强（P〈0．05）。以上实验结果提示一定浓度的水飞蓟宾对γδT细胞具有促进增殖作用，其机制可能与激活P—ERK1／2、Bcl-2、P—AKT及G—catenin信号通路有关。一定浓度的水飞蓟宾能够增加78T细胞对胃癌细胞的杀伤活性，其作用机制可能与水飞蓟宾能够增加78T细胞的穿孔素、GranB及CD107a的表达有关。