阿特拉津致PC12细胞损伤机制的研究

摘要

目的通过体外实验,探讨阿特拉津(atrazine,ATR)对多巴胺能神经元的的毒性作用及损伤的分子机制。方法在体外培养PC12细胞,加入不同浓度ATR染毒,在12和24 h收获细胞和培养液,通过高效液相色谱荧光法(HPLC-FL)测定多巴胺(Dopamine,DA)浓度,通过逆转录聚合酶链反应(real-time PCR)和蛋白质印迹法(Western-blot)检测ATR对PC12细胞酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)、核受体相关因子1(nuclear receptor-related factor 1,Nurr1)、巴胺转运体(dopamine transporter,DAT)和囊泡单胺转运体2(vesicular monoaminetransporter 2,VMAT2)基因表达的影响与蛋白表达量的变化,并用SPSS17.0进行统计学分析。结果 HPLC-FL显示随着ATR染毒剂量的增加,细胞DA含量呈剂量依赖性降低(P<0.05),并随时间增长减少。Real-time PCR结果显示,用100、200和400μmol/L浓度的ATR染毒12与24 h的PC12细胞,与对照组比较差异显著(P<0.05),存在剂量-反应关系,呈负相关性。PC12细胞中Nurr1、DAT、VMAT2、TH蛋白显著降低(P<0.05)。结论 ATR通过影响巴胺代谢途径中的相关酶及其调控酶形成的基因致PC12细胞多巴胺能损伤。