葡萄VlCKX8基因克隆与植物生长调节剂响应分析

摘要

细胞分裂素氧化酶/脱氢酶(cytokinin oxidase/dehydrogenase, CKX)作为不可逆降解细胞分裂素的酶,对维持细胞分裂素稳态发挥重要作用。本研究以‘巨峰’(Vitis vinifera×Vitis labrusca)葡萄为试材克隆了细胞分裂素氧化酶/脱氢酶8 (VlCKX8)的基因及其启动子,并进行了表达特性分析和启动子活性分析。结果表明:VlCKX8基因cDNA序列全长为1 278 bp,包含一个1 212 bp的开放阅读框,编码403个氨基酸。RT-qPCR结果显示VlCKX8的表达水平在细胞分裂素生物合成抑制剂洛伐他汀处理之后先上调后下调。启动子活性分析表明VlCKX8的启动子活性在氯吡苯脲、吲哚丁酸、茉莉酸甲酯处理后均增强,在赤霉素、脱落酸处理之后减弱。上述结果为研究细胞分裂素调控坐果的分子机理提供参考依据,同时也为生产实践中科学使用植物生长调节剂调控果实坐果提供理论指导。