猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5蛋白在昆虫细胞中的可溶性表达

摘要

猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)GP5蛋白是该病毒基因工程亚单位疫苗研究的重要靶向抗原,基因变异较大,且难以高效表达。本研究通过比对美洲型PRRSV 3种基因亚型的代表性毒株GP5蛋白的氨基酸序列,选取其同源性较高的氨基酸序列组合为杂合GP5(xGP5m),并在其N端分别添加3种穿膜肽序列(TAT、ppTG20、MPG),克隆至杆状病毒表达载体pFastBac^(TM)Dual,构建获得4株重组杆状病毒,Western blot、间接免疫荧光试验和小鼠试验结果显示,TAT能明显提高GP5蛋白的可溶性表达水平,且能增强小鼠对GP5蛋白的免疫应答能力,为PRRSV亚单位疫苗的研制奠定了基础。