应用双重PCR和16SrRNA测序法鉴定河南省结核分枝杆菌和非结核分枝杆菌

摘要

目的探讨应用双重PCR技术和16S rRNA测序法鉴定非结核分枝杆菌的可靠性。方法对178株临床分离菌株用结核分枝杆菌复合体群的IS6110序列(850 bp)和MT序列(361 bp),采用2对特异性引物进行扩增,并与标准菌株比较;对筛选出的非结核分枝杆菌用16S rRNA测序。结果 171株结核分枝杆菌临床分离株中,157株扩增出与结核分枝杆菌H37RV标准株相同的361 bp、850 bp 2条DNA片段,敏感性达97.8%,特异性为100%;3株只有890 bp一条DNA片段,是结核分枝杆菌复合群(MTC);11株初步认定是非结核菌,进一步用16S rRNA测序法测序,有5株为非结核分枝杆菌(NTM)。结论应用多重PCR方法和16S rRNA测序法,对结核分枝杆菌及非结核分枝杆菌进行鉴定,结果准确、可靠,具有很好的应用价值。