镉对人胚胎神经干细胞增殖抑制及对金属硫蛋白各亚型的诱导表达

摘要

[目的]探讨镉对人胚胎神经干细胞增殖能力的影响和对金属硫蛋白(MT)各亚型的诱导表达。[方法]以0、1.25、2.5、5μmol/L氯化镉(Cd Cl2)染毒人胚胎神经干细胞24 h后,以四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定细胞活力,5-乙炔基-2′脱氧尿苷(Ed U)法测定细胞增殖能力,分光光度法测定培养上清中乳酸脱氢酶活性(LDH),应用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测镉对人胚胎神经干细胞MT 10个亚型的m RNA表达的影响。[结果]与对照组相比,浓度为2.5、5μmol/L Cd Cl2染毒组细胞活力明显降低,差异具有统计学意义(P<0.01);且细胞相对存活率与Cd Cl2浓度呈负相关(r=-0.98,P<0.01)。1.25μmol/L及以上镉可明显抑制DNA的复制(P<0.05),且细胞增殖与Cd Cl2浓度对数值呈负相关(r=-0.91,P<0.01)。与对照组相比,各染毒组细胞培养上清中LDH水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01),且细胞培养上清中LDH水平与Cd Cl2浓度呈正相关(r=0.97,P<0.01)。与对照组相比,MT基因各亚型的m RNA表达水平随着Cd Cl2染毒浓度的升高而升高,差异均有统计学意义(均P<0.05)。[结论]镉可引起人神经胚胎干细胞自我更新功能的抑制,表现为细胞活力和增殖能力的下降,细胞培养液中LDH含量的上升,细胞MT基因各亚型m RNA表达水平的明显升高。