亚砷酸钠对人皮肤角质形成细胞BER相关基因H4K20me1修饰水平及其mRNA转录水平影响

摘要

目的了解不同剂量亚砷酸钠(NaAsO_2)对人永生化皮肤角质形成细胞(HaCaT细胞)碱基切除修复(BER)基因聚腺苷酸二磷酸核糖聚合酶-1(PARP1)、N-甲基化嘌呤-DNA-糖基化酶(MPG)、X射线修复交叉互补基因-1(XRCC1)启动子区和编码区组蛋白H4第20位赖氨酸一甲基化(H4K20me1)修饰水平及其mRNA转录水平的影响。方法以0.00、2.50、5.00、10.00μmol/L的NaAsO_2处理HaCaT细胞24h。应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测MPG、PARP1、XRCC1基因mRNA表达水平;定量染色质免疫沉淀技术(CHIP-qPCR)检测MPG、PARP1、XRCC1基因启动子区(CHIP1、CHIP2区域)和编码区(CHIP3、CHIP4区域)H4K20mel修饰水平。结果 (1)MPG、PARP1、XRCC1基因mRNA表达水平检测结果:2.5μmol/L染砷组MPG、PARP1、XRCC1基因mRNA表达水平与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05),5.00、10.00μmol/L组mRNA表达水平随染毒剂量的增加而降低,与对照组比较,各差异有统计学意义(P0.05),5.00、10.00μmol/L染毒组HaCaT细胞XRCC1基因启动子CHIP1、CHIP2区和10.00μmol/L染毒组PARP1基因启动子CHIP1区H4K20me1的富集与对照组相比明显减少,各差异有统计学意义(P<0.05);基因编码区,5.00、10.00μmol/L染毒组HaCaT细胞MPG.、PARP1、XRCC1基因编码CHIP3、CHIP4区H4K20mel的富集与对照组相比明显减少,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 NaAsO_2可通过抑制HaCaT细胞PARP1、XRCC1基因启动子区和MPG、PARP1、XRCC1基因编码区H4K20mel的表达水平,使MPG、PARP1、XRCC1基因mRNA转录水平下降。