AP-1在锌离子诱导BEAS-2B细胞COX-2基因转录中作用

摘要

目的探讨外源性锌离子对人支气管上皮细胞环氧化酶2(COX-2)基因诱导表达及转录因子激活蛋白-1(AP-1)的转录活性调节作用。方法以人支气管上皮细胞株BEAS-2B作为体外模型,Real-time PCR方法检测锌离子对BEAS-2B细胞COX-2基因表达影响;染色质免疫沉淀(ChIP)实验检测50.0μmol/L锌离子温育8 h后c-Jun(AP-1亚单位)和COX-2启动子的结合;用野生型和AP-1结合位点突变的COX-2启动子报告质粒转染BEAS-2B细胞,50.0μmol/L锌离子温育8 h,采用荧光素酶报告基因检测COX-2基因启动子转录活性。结果 50.0μmol/L Zn2+组BEAS-2B细胞中COX-2的mRNA相对表达量为(1.23±0.16),是对照组表达量(0.16±0.02)的7.68倍,表达明显升高(P<0.5);AP-1可与COX-2的基因启动子结合,COX-2基因启动子区AP-1结合位点突变可使锌离子所致的COX-2高转录活性降低82%。结论转录因子AP-1可调节外源性锌离子所致人支气管上皮细胞COX-2基因的转录表达。