细颗粒物(PM_(2.5))降尘促进16HBE人支气管上皮细胞的自噬和上皮间质转化

摘要

目的探讨细颗粒物(PM_(2.5))降尘对16HBE人支气管上皮细胞自噬和上皮间质转化(EMT)的影响及其机制。方法PM_(2.5)降尘染毒16HBE细胞后,CCK-8法检测细胞存活率,显微镜观察细胞形态变化,单丹磺酰尸胺(MDC)染色法检测自噬活性,流式细胞术检测自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)预处理16HBE细胞前后胞内活性氧(ROS)水平,Western blot法检测3-MA预处理16HBE细胞前后微管相关蛋白1轻链3Ⅱ(LC3-Ⅱ)、LC3-Ⅰ、上皮钙黏蛋白(E-cadherin)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达。结果PM_(2.5)降尘染毒可降低16HBE细胞存活率,并观察到部分细胞失去原有形态出现间质细胞特征,与对照组相比,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、α-SMA蛋白表达增加,E-cadherin降低,ROS水平增加;自噬抑制剂3-MA预处理16HBE细胞后,α-SMA蛋白表达降低,E-cadherin升高,并伴随着胞内ROS水平的下降。结论PM_(2.5)降尘促进16HBE细胞的自噬和EMT,且自噬促进EMT过程。