化学发光ELISA检测可溶型CD100(sCD100)方法的建立及其应用

摘要

目的建立可溶型CD100(sCD100)的微孔板式化学发光检测试剂盒,并初步用于临床脑脊液标本的检测。方法利用空军军医大学免疫学教研室制备的2株抗CD100单克隆抗体(mAb),在夹心ELISA的基础上,优化实验条件,建立sCD100化学发光免疫检测方法;对该方法的灵敏度、精密度进行评价;并检测了18例脑脊液标本的sCD100水平。结果化学发光法检测sCD100在0.098 ng/mL^12.5 ng/mL范围内线性关系良好,检测敏感性能达到0.12 ng/mL。批内变异系数为3.8%~6.6%,批间变异率为6.2%~14.1%。用该方法检测病毒性脑炎患者脑脊液,平均sCD100水平显著升高,2例患者标本分别高出正常均值9.4及13.8倍。结论成功建立了快速、敏感和稳定的sCD100化学发光检测法,可用于脑脊液标本中微量sCD100的定量分析。