黄芩苷增强N2a/APPswe细胞的抗氧化能力并促进核因子E2相关因子2(Nrf2)的核转位

摘要

目的探讨黄芩苷对阿尔茨海默病(AD)转基因N2a/APPswe细胞的保护作用及可能机制。方法应用(0.1、0.5、1、5、10、20)μmol/L黄芩苷处理N2a/APPswe细胞,MTT法检测黄芩苷对细胞存活率的影响。用(1、5、10)μmol/L黄芩苷处理细胞48 h,通过黄嘌呤氧化酶法检测各组细胞超氧化物歧化酶(SOD)的活性,硫代巴比妥酸法检测各组细胞培养上清液的丙二醛(MDA)的含量。荧光实时定量PCR测定核因子E2相关因子2(Nrf2)的mRNA表达,Western blot法检测细胞总Nrf2、核内Nrf2和核因子κB(NF-κB)的蛋白水平。免疫荧光染色观察Nrf2在细胞内的分布。结果 MTT试验结果显示,黄芩苷能促进N2a/APPswe细胞增殖。与对照组相比,模型组SOD活性明显降低,MDA含量明显增多,而黄芩苷能提高SOD活性,抑制MDA的生成,尤其以高剂量组最为明显。黄芩苷处理组与模型组相比Nrf2 mRNA和总蛋白表达均无明显差异,但黄芩苷处理后能显著增加细胞核内Nrf2的含量,下调细胞核内NF-κB的水平。免疫荧光染色结果也证明,黄芩苷能促进Nrf2的核转位。结论黄芩苷增强N2a/APPswe细胞的抗氧化能力并促进Nrf2的核转位。