基于转运体MRP2和P-gp研究甘草酸对雷公藤多苷所致肝损伤的保护作用及机制

摘要

目的基于药物转运体多药耐药相关蛋白2(MRP2)、P-糖蛋白(P-gp)探讨甘草酸对雷公藤多苷所致肝损伤的保护作用及机制。方法将40只雄性SD大鼠随机分为4组,即空白组、雷公藤多苷组、甘草酸组以及联合组(雷公藤多苷+甘草酸)。采用ELISA法测定大鼠血清及胆汁中谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、总胆红素(TBIL)和总胆汁酸(TBA)的水平,通过HE染色判断大鼠肝脏病理情况。运用qRT-PCR法和Western blot法检测MRP2、P-gp基因和蛋白的表达情况。结果与空白组比较,雷公藤多苷组大鼠血清中AST、ALT、TBA、TBIL显著上升(P<0.01),胆汁中TBA、TBIL含量显著降低(P<0.01)。与雷公藤多苷组比较,联合组大鼠血清中AST、ALT、TBA、TBIL显著降低(P<0.05,P<0.01),胆汁中TBA、TBIL含量升高(P<0.05,P<0.01)。肝脏病理结果显示,雷公藤多苷组肝细胞排列紊乱,部分区域可见坏死灶;联合组中甘草酸能有效改变雷公藤多苷对肝细胞的损伤作用;空白组以及甘草酸组未见异常变化。与空白组比较,雷公藤多苷组大鼠肝脏Mdr1a、Mdr1b、MDR2 mRNA表达量以及P-gp蛋白表达均明显降低(P<0.05,P<0.01),同时MRP2 mRNA表达量和蛋白表达也显著下降(P<0.05,P<0.01)。联合组Mdr1a、Mdr1b、MDR2 mRNA以及P-gp蛋白表达显著上调(P<0.05,P<0.01),MRP2 mRNA表达量和蛋白表达也不同程度被上调(P<0.05,P<0.01)。结论雷公藤多苷所致肝损伤可能是抑制了肝脏MRP2和P-gp转运体,导致毒性物质外排减少,而甘草酸可以上调MRP2和P-gp基因和蛋白的表达,逆转雷公藤多苷对转运体的抑制作用,加快毒素排出,降低雷公藤多苷对肝脏的损伤。