LC-MS/MS法同时测定肾移植患者血浆中霉酚酸及两种代谢物浓度

摘要

目的建立LC-MS/MS法同时测定肾移植患者血浆中霉酚酸(MPA)及其代谢物MPAG和AcMPAG的浓度。方法以稳定同位素(MPA-d3)为内标、甲醇-乙腈溶液(9∶1,V/V)沉淀蛋白,采用色谱柱Kinetex C18(3 mm×100 mm,2.6μm,Phenomenex,USA),流动相为水(0.1%甲酸,10 mmol·L^(-1)乙酸铵)-甲醇(0.1%甲酸)溶液,梯度洗脱,流速0.55 mL·min^(-1)。质谱选用ESI离子源,正离子多反应监测扫描检测,测定肾移植患者服药前及服药后血浆MPA及代谢物MPAG和AcMPAG的浓度。结果MPA在0.2~50μg·mL^(-1),MPAG在1~250μg·mL^(-1),AcMPAG在0.08~20μg·mL^(-1)与测定值线性关系良好,定量限分别为0.2、1和0.08μg·mL^(-1)。MPA及其代谢物日内与日间精密度、准确度、提取回收率、基质效应、稳定性均符合方法学要求。结论本法快速、灵敏、准确,可用于检测肾移植患者血浆中MPA及代谢物MPAG和AcMPAG的浓度。