IU1抑制USP14对人卵巢癌细胞缝隙连接及顺铂毒性影响的研究

摘要

目的探究1-[1-(4-氟苯基)-2,5-二甲基-1H-吡咯-3-基]-2-(1-吡咯烷基)乙酮(IU1)抑制泛素特异性蛋白酶14(USP14)对人卵巢癌细胞HO9810、OVCRA3的顺铂毒性的影响及其机制。方法采用CCK-8法测定不同浓度IU1对HO9810、OVCRA3细胞的增殖抑制率及IU1对顺铂细胞毒性的影响;采用去泛素化酶活性实验对IU1作用于HO9810、OVCRA3细胞后USP14活性的变化进行研究;采用Western blot检测IU1作用于HO9810、OVCRA3细胞后cleaved-caspase 3和连接蛋白32(Cx32)表达水平的变化;采用细胞接种荧光示踪法测定IU1对人卵巢癌细胞HO9810、OVCRA3细胞缝隙连接(GJ)的影响。结果 IU1能降低USP14的活性;IU1能降低顺铂的细胞毒性,抑制细胞凋亡;IU1对Cx32的蛋白表达水平无影响,但能抑制细胞间GJ通信功能。结论 IU1可以降低顺铂的细胞毒性,该作用可能与IU1抑制卵巢癌细胞HO9810、OVCRA3的GJ通讯功能有关,与Cx32蛋白表达水平变化无关。