傣药咪多领通过miR-27b-3p/GDF-6分子轴对增生性瘢痕成纤维细胞的作用机制

摘要

目的探讨傣药咪多领通过miR-27b-3p/GDF-6分子轴对增生性瘢痕成纤维细胞的影响。方法收集增生性瘢痕(hypertrophic scar,HS)组织及其配对正常皮肤组织,并分别分离两组织中的成纤维细胞HSFs和NSFs。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-27b-3p及GDF-6、COL1a2、COL3a1和α-SMA mRNA的表达水平;蛋白免疫印迹(Western blot)实验检测GDF-6、COL1a2、COL3a1和α-SMA蛋白的表达水平;CCK-8和EdU检测HSFs细胞的增殖活力;使用ANNEXIN V-FITC/PI试剂盒检测HSFs细胞的凋亡水平。结果傣药咪多领可以下调HSFs细胞中GDF-6、COL1a2、COL3a1和α-SMA的表达水平,并抑制HSFs细胞增殖(P<0.05)。miR-27b-3p在HS组织和HSFs细胞中异常低表达,且傣药咪多领能上调miR-27b-3p的表达(P<0.05)。miR-27b-3p靶向负调控GDF-6的表达水平(P<0.05)。敲降miR-27b-3p或过表达GDF-6上调HSFs细胞中GDF-6、COL1a2、COL3a1和α-SMA的表达水平,并促进HSFs细胞增殖(P<0.05)。结论傣药咪多领通过上调miR-27b-3p抑制GDF-6的表达水平,从而抑制增生性瘢痕成纤维细胞HSFs中GDF-6、COL1a2、COL3a1和α-SMA的表达水平并抑制HSFs细胞增殖。