甜樱桃扩展蛋白PavEXPA2基因克隆与表达分析

摘要

为揭示甜樱桃中扩展蛋白基因的结构与功能,克隆了甜樱桃PavEXPA2基因,并分析了该基因在不同组织(茎、花芽、盛开花朵、幼叶、老叶、幼叶叶柄、老叶叶柄、2个脱落高峰期正常果柄与即将脱落果柄、2个脱落高峰期正常果实与脱落果实)及逆境胁迫(使用20%PEG6000和20 mmol/L NaCl溶液分别模拟干旱和盐胁迫,分别处理0、2、4、6、8 h)下的表达情况。结果显示:PavEXPA2基因cDNA全长序列为1 035 bp,开放阅读框(ORF)为852 bp,编码283 aa,蛋白等电点为8.90,分子质量约为30.81 ku,含有2个跨膜螺旋结构和1个信号肽,亚细胞定位预测PavEXPA2定位于细胞壁;组织表达分析显示,PavEXPA2基因在甜樱桃易脱落组织中表达量较高,如盛开花瓣,即将脱落的果柄、果实、叶柄等,其中在即将脱落叶柄中表达量最高;相对于未处理样品,干旱处理样本PavEXPA2表达量上升,在处理6 h时表达量达到最高,随后降低;盐胁迫条件下,PavEXPA2表达量呈先下降后上升再下降的趋势,其中在处理6 h时表达量达到最高。结果表明,甜樱桃可能通过PavEXPA2基因上调促进脱落而抵御逆境胁迫。