LINC00707对脂多糖诱导的大鼠心肌细胞炎症损伤的影响和机制

摘要

目的 研究LINC00707在脓毒症患者血清中的表达及其对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的大鼠心肌细胞炎症损伤的影响和机制。方法 实时定量聚合酶链反应(quantitative real time polymerase chain reaction,qRT-PCR)测定脓毒症患者血清中LINC00707表达情况。心肌细胞H9C2用10μg·mL^(-1)LPS复制脓毒症模型,转染si-NC、si-LINC00707、微小RNA(microRNA,miR)-NC、miR-338-3p mimic、si-LINC00707与anti-miR-NC、si-LINC00707与anti-miR-338-3p,并进行LPS损伤。采用酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)测定炎症因子肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)浓度,流式细胞仪检测H9C2细胞的凋亡,Western Blot检测活化半胱氨酸蛋白酶-3(cleaved-cysteinyl aspartate specific proteinase-3,cleaved-caspase-3)蛋白的表达,双荧光素酶活性实验分析LINC00707对miR-338-3p的靶向调控。结果 脓毒症患者血清中和LPS诱导的H9C2细胞中,LINC00707表达水平(2.14±0.25或1.93±0.15)上调(P<0.05)。LPS诱导的H9C2细胞中TNF-α、IL-6浓度、cleaved-caspase-3蛋白表达水平和细胞凋亡率(24.13%±1.51%)升高(P<0.05)。而转染si-LINC00707或miR-338-3p mimc后,LPS诱导的H9C2细胞中TNF-α、IL-6浓度、cleaved-caspase-3蛋白表达水平和细胞凋亡率均降低(P<0.05)。LINC00707靶向miR-338-3p,且调控miR-338-3p的表达。Anti-miR-338-3p可以逆转si-LINC00707抑制LPS处理的H9C2细胞凋亡和炎症因子表达的效果。结论 LINC00707在脓毒症患者血清中高表达,敲减LINC00707可以抑制LPS处理的大鼠心肌细胞的凋亡和炎症因子表达。