新型鸡白细胞介素15真核表达质粒构建及其体外表达

摘要

应用重叠扩增PCR(SOEPCR)技术将鸡白细胞介素15(ChIL-15)的冗长信号肽序列替换为较短的鸡白细胞介素2(ChIL-2)信号肽序列,构建了一种新型ChIL-15融合基因(NChIL-15)。将其连接到克隆载体pMD18-T中得到重组克隆质粒pMD18T-NChIL-15。阳性克隆质粒经鉴定正确后将NChIL-15基因亚克隆入真核表达载体pcDNA3.1(+)中,得到重组阳性表达质粒pcDNA3.1(+)-NChIL-15。阳性表达质粒经鉴定正确后应用磷酸钙法体外转染293T细胞,通过间接免疫荧光试验(IFA)检测到了NChIL-15蛋白在293T细胞中的表达。本研究为NChIL-15佐剂作用的深入研究奠定了基础。