地钱素C对慢性粒细胞白血病K562细胞增殖抑制作用的初步研究

摘要

目的观察双联苄化合物地钱素C(Marchantin C,MC)对慢性粒细胞白血病K562细胞的增殖抑制作用,初步探讨其抑制K562细胞增殖的作用机制。方法将3、6、12μmol/L的MC作用K562细胞24 h,采用倒置显微镜观察细胞形态学变化,MTT法检测细胞增殖抑制率,DAPI染色观察细胞凋亡,流式细胞术检测细胞凋亡率及周期,Western blotting检测凋亡相关蛋白表达的变化。结果倒置显微镜下MC处理组细胞出现不同程度的分裂受阻、形态不规则,细胞皱缩、核破碎、核溶解等改变。MTT结果显示MC能有效抑制K562细胞增殖。流式细胞术结果显示MC能有效诱导K562细胞凋亡。细胞周期检测结果显示细胞被阻滞在G_(2)/M期。Western blotting结果显示随着MC浓度的增加,剪切形式的Caspase-3表达发生变化,其底物PARP被逐渐剪切,Akt、mTOR、p70S6K的磷酸化形式p-Akt、p-mTOR、p-p70S6K表达有所下调。结论MC能有效抑制K562细胞的增殖,诱导其凋亡,其机制与Akt/mTOR信号通路被抑制有关。