不同截短U3启动子在棉花中的功能分析

摘要

从海岛棉中克隆了2种GbU3-2P、GbU3-3P启动子,对它们进行2种长度截短,长度分别为436、245 bp和384、233 bp,同时构建了4个相应启动子驱动GUS的融合植物表达载体.利用农杆菌真空渗透转化法将4个GbU3Ps::GUS-sgRNA-P1300植物表达载体分别转染棉花胚性愈伤组织.经GUS组织化学染色显示:克隆得到的2种截短大小的GbU3-2P和GbU3-3P启动子均能驱动GUS基因在棉花愈伤组织中表达,棉花愈伤组织被染成蓝色,但颜色深浅没有显著差异.本研究表明,同一GbU3启动子截短后,较短的启动子和较长的启动子具有相同的转录活性.这为构建棉花CRISPR/Cas9基因组编辑载体系统提供了更多理想的启动子.