EZH2对神经干细胞增殖的调控及其机制研究

摘要

目的 探究Zeste基因增强子同源物2(EZH2)对体外培养的神经干细胞增殖的调控作用及潜在机制.方法 采取第3～6代正常人神经干细胞,分别利用慢病毒构建稳转细胞株:EZH2基因过表达细胞(OV-EZH2)及对照细胞(OV-Control)、EZH2基因shRNA敲降细胞(sh-EZH2)及对照细胞(sh-Control).CCK-8法和EdU染色法检测4种细胞的活力,流式细胞术检测细胞周期及凋亡,Western blot和实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测相关蛋白表达水平.结果 与OV-Control细胞相比,OV-EZH2细胞48、72、96 h时细胞增殖水平上调,且差异有统计学意义(P＜0.05);与sh-Control细胞相比,sh-EZH2细胞在48、72、96 h时细胞增殖水平下调,且差异有统计学意义(P＜0.05);EZH2基因敲降造成细胞周期阻滞在G1期(P＜0.05),而OV-EZH2加速细胞进入细胞周期S和G2期(P＜0.05);EZH2干扰或过表达对细胞凋亡无明显影响(P＞0.05);同时,与OV-Control细胞相比,OV-EZH2细胞增殖相关蛋白CyclinD1和c-Myc蛋白表达水平上调,且差异有统计学意义(P＜0.05).结论 EZH2基因能够通过促进CyclinD1和c-Myc蛋白表达水平上调,促进神经干细胞的增殖.