耳后进路大鼠耳蜗中阶侧壁显微注射携带EGFP慢病毒的实验研究

摘要

目的 探讨经大鼠耳后进路耳蜗中阶侧壁导入携带增强型绿色荧光蛋白(EGFP)慢病毒的实验可行性,为后续携带目的 基因慢病毒治疗大鼠感音神经性聋的实验打下基础.方法 大鼠经耳后进路,耳蜗中阶侧壁开孔,显微注射携带EGFP慢病毒液或人工内淋巴液.术后3周,处死动物取耳蜗,行耳蜗冰冻切片,荧光显微镜下观察携带EGFP慢病毒的表达情况.术前和术后3周动物处死前,行听性脑干反应(ABR)检测其听功能改变.结果 术中、术后动物一般情况好.EGFP可见在耳蜗中阶血管纹边缘细胞、Corti器、螺旋神经和螺旋神经节细胞内表达.术后实验组大鼠手术耳ABR阈值提高(55.8±4.9)dB SPL.结论 大鼠经耳后进路,耳蜗中阶侧壁开窗,可将慢病毒携带的EGFP基因导入,并在耳蜗中阶Corti器表达.