肝癌细胞下调IGF-1活性因子对Ras癌基因诱导小鼠肝肿瘤影响分析

摘要

目的 分析肝癌细胞下调胰岛素生长因子(IGF-1)活性因子对Ras癌基因诱导小鼠肝肿瘤的影响.方法 选取3、5、9月龄Ras癌基因诱导雄性小鼠各10只,同时选取非转基因3、5、9月龄雄性小鼠各10只,提取9月龄Ras癌基因诱导雄性小鼠肿瘤组织、肿瘤周围组织样品为实验组,同时提取9月龄非转基因小鼠肝组织样品作为对照组,提取两组样品总RNA和蛋白质,选用蛋白质印迹法对其细胞外信号调节激酶(ERK)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)蛋白表达进行检测;选用荧光定量PCR法对IGF-1、GHR、IGFBP3的mRNA表达水平进行检测;选用酶联免疫法对小鼠血清IGF-1水平进行检测;对3、5、9月龄Ras癌基因诱导雄性小鼠及非转基因小鼠外周血中B淋巴细胞、活性B淋巴细胞比例进行检测.结果 Ras癌基因小鼠诱导肿瘤组织ERK、PI3K、AKT平均蛋白表达水平与肿瘤周围组织比较,差异有统计学意义(P＜0.05);Ras癌基因诱导小鼠肿瘤组织、肿瘤周围组织ERK、PI3K、AKT蛋白平均表达水平与对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05);Ras癌基因诱导小鼠肿瘤组织IGF-1、GHR、IGFBP3的mRNA平均表达水平(0.27±0.05)、(0.23±0.02)、(19.48±2.54)与肿瘤周围组织(1.25±0.07)、(0.89±0.17)、(3.25±0.56)比较,差异有统计学意义(P＜0.05);肿瘤周围组织IGF-1、GHR、IGFBP3的mRNA平均表达水平与对照组比较,差异无统计学意义(P＞0.05);3月龄Ras癌基因诱导小鼠血清IGF-1水平(61.72±9.24) μg/mL与非转基因小鼠(58.89±8.16)μg/mL比较差异无统计学意义(P＞0.05);月龄5、9个月Ras癌基因诱导小鼠血清IGF-1水平(51.28±5.27)、(40.28±6.28)μg/mL均低于非转基因小鼠(55.32±7.91)、(49.52±6.94) μg/mL,差异有统计学意义(P＜0.05);3、5、9月龄Ras癌基因诱导小鼠B淋巴细胞比例均低于非转基因小鼠,差异有统计学意义(P＜0.05);3、5月龄Ras癌基因诱导小鼠活性B淋巴细胞比例与非转基因小鼠比较差异无统计学意义(P＞0.05);9月龄Ras癌基因诱导小鼠活性B淋巴细胞(CD19+ CD69+、CD19+ CD25+)比例(0.77±0.13)、(1.42±0.17)低于非转基因小鼠(0.87±0.14)、(2.39±0.22),差异有统计学意义(P＜0.05).结论 IGF-1的表达的抑制,降低了PI3K、AKT、GHR的表达,提高了ERK、IGFBP3的表达,进而导致Ras癌基因通路的活化.