筋脉通含药血清对高糖培养背根神经节神经元氧化应激及细胞凋亡的影响

摘要

目的 探讨筋脉通(菟丝子、女贞子、桂枝、延胡索、水蛭、细辛等)含药血清对高糖培养大鼠背根神经节神经元(DRGn)氧化应激及细胞凋亡的影响.方法 雄性SD大鼠随机分为3组,分别灌胃筋脉通、维生素C或生理盐水制备含药血清和对照血清.从孕15 d的SD胎鼠背根神经节取材制备细胞悬液.MTT法确定高糖浓度、筋脉通含药血清浓度及指标检测时间点.将体外培养的DRGn分为高糖组、筋脉通组(加入筋脉通含药血清)、维生素C组(加入维生素C含药血清)及正常对照组,培养24 h后,采用荧光探针法检测DRGn中超氧阴离子、线粒体膜电位水平,免疫印迹法+实时荧光定量聚合酶链式反应法检测Bcl-2和Caspase-3的mRNA及其蛋白表达,原位末端标记法检测凋亡细胞.结果 与正常对照组相比,高糖组超氧阴离子水平显著升高,Caspase-3 mRNA及其蛋白表达、细胞凋亡率均显著升高,而线粒体膜电位、Bcl-2 mRNA及其蛋白表达显著降低(P＜0.01)；与高糖组比较,筋脉通组超氧阴离子水平明显降低,Caspase-3 mRNA及其蛋白表达、细胞凋亡率均明显降低,而线粒体膜电位、Bcl-2 mRNA及其蛋白表达显著升高(P＜0.01),其作用明显优于维生素C组(P＜0.01).结论 筋脉通含药血清可通过抑制高糖所致DRGn氧化应激、减少细胞凋亡起到防治糖尿病周围神经病变的作用.