制备高效液相色谱法分离纯化大黄酚和大黄素甲醚

摘要

目的 建立制备高效液相色谱分离纯化大黄酚和大黄素甲醚的方法.方法 用稀硫酸将脱脂后的大黄中总蒽醌苷水解成苷元,再用热三氯甲烷提取苷元,依次用一定浓度的不同碱溶液将三氯甲烷提取液中的大黄酸、大黄素、芦荟大黄素等杂质除去,氢氧化钠沉淀三氯甲烷溶液中的大黄酚和大黄素甲醚,盐酸调pH值,析出沉淀,沉淀物经真空干燥,得大黄酚和大黄素甲醚混合物粗品,所得粗品甲醇溶解,用制备高效液相色谱法,ZORBAX SB-C18色谱柱(21.2 mm ×250 mm,7μm),流动相为甲醇-0.1％磷酸溶液(85:15),体积流量为20 mL/min,检测波长为254 nm,柱温为28℃,进样量为8 mL,基于峰,分别收集大黄酚和大黄素甲醚馏分,馏分经真空冷冻干燥得大黄酚和大黄素甲醚单体.结果 大黄酚和大黄素甲醚纯度用面积归一化法和外标法定量,大黄酚纯度达到98.8％,大黄素甲醚纯度98.7％.1 H-NMR鉴定结构,与文献数据一致.结论 制备高效液相色谱法制备高纯度大黄酚和大黄素甲醚,操作简单,适于实验室大规模制备.