实时荧光定量聚合酶链反应技术及应用

摘要

从1985年Kary Mullis发明了聚合酶链反应（polymerase chain reaction,PCR）技术,到1988年Saiki发现耐热DNA聚合酶,使PCR进入应用阶段,至今已有近20年的历史了.实时荧光定量PCR（real-time quantitative PCR,RQ-PCR）在核酸定量方面具有高敏感性、特异性强、可重复性等优点,从应用以来,给分子诊断领域带来了一次革命,并被广泛应用,成为科研的主要工具之一.本研究旨在阐述RQ-PCR的基本原理,介绍5种荧光化学方法：水解探针（hydrolysisprobes）、分子信标（molecularbeacons）、荧光标记引物（fluorescently-labeled primer）、双杂交探针（dual hybridization probes）、双链DNA嵌合剂SYBR Green Ⅰ（the double-stranded DNA-intercalating agent SYBR Green Ⅰ）,并阐述其研究进展及应用.