白细胞介素-1β和黄芪对气道上皮细胞胰岛素样生长因子-1表达的影响

摘要

目的 通过检测经白细胞介素-1β(IL-1β)和黄芪共同干预后兔气道上皮细胞胰岛素样生长因子-1(IGF-1)蛋白的表达水平,探讨IL-1β对气道上皮细胞IGF-1表达的影响,以及黄芪在哮喘气道重塑中的防治作用.方法 将体外培养的气道上皮细胞随机分为实验组和对照组,实验分3步进行:①实验组用1ng/ml的IL-1β作用于体外培养的兔气道上皮细胞,分别在不同时间点(4、8、16、24、48 h)收集培养上清液及贴有细胞的盖玻片;②实验组随机分为IL-1β 0.05、0.1、1、10 ng/ml组,分别用不同浓度的IL-1β作用于体外培养的兔气道上皮细胞,在16 h时收集培养上清液及细胞爬片.以上对照组加入等量培养液;③实验组随机分为黄芪50、200、500mg/ml组,分别用不同浓度的黄芪加入终浓度为10 ng/ml的IL-1β干预的气道上皮细胞中,对照组只加入终浓度为10 ng/ml的IL-1β,于16 h后收集培养上清液及贴有细胞的盖玻片.用免疫细胞化学染色法和双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定IGF-1蛋白的表达.从而分析不同浓度,不同时间IL-1β和不同浓度黄芪对体外培养的气道上皮细胞分泌IGF-1的影响.结果 ①经IL-1β 1 ng/ml处理后气道上皮细胞及培养上清液IGF-1的表达水平分别为16 h(0.577±0.036,0.141±0.017)、24 h(0.537±0.041,0.114±0.032)、48 h(0.527±0.067,0.107±0.027)均高于对照组(0.259±0.012,0.054±0.014;0.260±0.012,0.053±0.005;0.267±0.014,0.056±0.009),差异有统计学意义(P值均＜0.05),而这三组之间比较差异无统计学意义,加入IL-1β 1 ng/ml后,气道上皮细胞IGF-1表达增加,至16 h达高峰,之后基本呈平台趋势.②IL-1β 0.1 ng组(0.328±0.012,0.084±0.021)、1 ng组(0.471±0.018,0.113±0.019)、10 ng组(0.569±0.031,0.145±0.021)气道上皮细胞及培养上清液中IGF-1的表达水平均高于对照组(0.260±0.019,0.051±0.012)及0.05 ng组(0.283±0.027,0.053±0.031),差异有统计学意义(P分别＜0.05).IL-1β 10 ng组气道上皮细胞及培养上清液中IGF-1的表达水平明显高于其它各组(P分别＜0.05),而IL-1β 0.05 ng组与对照组差异无统计学意义.③与对照组(0.56±0.03,0.14±0.16)比较,黄芪50 mg组(0.454±0.050,0.104±0.013)、黄芪200 mg组(0.391±0.080,0.085±0.014)、黄芪500 mg组(0.296±0.074,0.073±0.014)气道上皮细胞及其在培养上清液中的表达水平均降低,差异有统计学意义(P值均＜0.05),黄芪500 mg组与对照组及黄芪50 mg组比较,差异有统计学意义(P均＜0.05),而与黄芪200 mg组比较差异无统计学意义.结论 IL-1β可促进气道上皮细胞IGF-1的蛋白表达,黄芪对上述过程有抑制作用.