重组人白细胞介素24蛋白对胰腺癌细胞生长的影响

摘要

目的 构建人白细胞介素24(IL-24)基因的表达载体并在大肠杆菌中诱导表达,观察纯化后的IL-24融合蛋白导致人胰腺癌细胞(Pane-1)生长抑制的作用.方法 用限制性内切酶从质粒pET30b-II-24中酶切获取人IL-24 cDNA片段.并将该片段与pET42a原核表达载体基因重组,在大肠杆菌中实现重组基因的表达,提取并纯化rhIL-24蛋白.用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDS-PAGE)和Western blot对表达产物进行鉴定.以不同浓度的重组蛋白IL-24与胰腺癌细胞Panc-1、正常肝胚细胞CCC-HEI,-1共培养48 h,同时设立相应浓度梯度的HIS-GST融合蛋白组对照组.采用四甲基偶氮唑蓝(MTY)法检测各组细胞的生长抑制情况.结果 酶切结果 证实,成功构建了pET42a-IL24原核表达载体,并在大肠杆菌中获得稳定的表达.rhIL-24蛋白以浓度依赖性的关系抑制Panc-1细胞的生长,抑制率明显高于HIS-GST蛋白.结论 rhIL-24蛋白对胰腺癌细胞Panc-1生长有抑制作用.