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马铃薯PVY和PLRV病毒的TC-RT-PCR检测

         

摘要

传统的RT-PCR技术检测病毒需提取总RNA,RNA容易降解.利用试管捕捉反转录扩增(Tube cap?ture RT-PCR,TC-RT-PCR)方法检测了PVY和PLRV 2种病毒,实现了不需提取总RNA也可在同一反应中同时检测2种病毒.根据已报道的引物用TC-RT-PCR的方法对PVY和PLRV的外壳蛋白基因进行了检测.结果表明,TC-RT-PCR能够成功的检测出感染PVY或PLRV以及2种病毒共同侵染的样品,扩增产物序列长度均与设计片段的长度相符,分别为781和364 bp,2种病毒扩增产物的测序结果同GeneBank中已知的序列比对后的同源性均高达97%以上.该技术为单独或复合感染的马铃薯病毒的检测提供了更加方便、高效的方法.同时测得试验PVY病毒样本属于PVYNW株系.

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