小分子Pin1抑制剂XP08075的抗肿瘤作用研究

摘要

目的：本研究旨在观察小分子肽脯氨酰顺反异构酶Pin1抑制剂XP08075的体外抗肿瘤作用及其对细胞周期及Pin1相关信号通路的影响。方法：WesternBlot法检测多种肿瘤细胞株的Pin1蛋白表达水平，选定相对低表达Pin1的HepG2细胞，脂质体法稳定转染pCMV-Pin1质粒构建高表达Pin1的肝癌细胞模型，MTT检测XP08075对不同肿瘤细胞、亲本HepG2细胞以及高表达Pin1HepG2细胞的生长抑制作用；生长曲线及流式细胞术检测XP08075对肿瘤细胞倍增时间及细胞周期的影响：WesternBlot分析XP08075对Pin1蛋白水平以及Pin1相关信号通路的影响。结果：MTT实验显示XP08075能显著抑制各种肿瘤细胞的增殖，IC50在微摩尔水平，且抑制水平与肿瘤细胞Pin1表达水平有-定相关性：成功构建并鉴定Pin1高表达的HepG2肝癌细胞模型，MTT实验显示，高表达Pin1的HepG2细胞较亲本株更敏感；生长曲线结果显示，XP08075能明显降低HepG2及MCF-7细胞的倍增时间；流式细胞术结果显示，XP08075对MCF-7细胞的周期无显著影响；Westernblot结果显示，XP08075可以呈时间依赖的抑制Pin1的蛋白水平，抑制Pin1下游相关蛋白CyclinB1，β—catenin的表达。结论：小分子Pin1抑制剂XP08075可以通过抑制Pin1表达从而抑制肿瘤细胞的增殖，Pin1抑制剂有望成为新型的抗肿瘤治疗靶点。