DEN诱导大鼠肝纤维化-肝癌过程中pSmad3L和 PAI-1蛋白的表达

摘要

目的建立二乙基亚硝胺(diethylinitrosamine,DEN)诱导大鼠肝纤维化-肝癌模型,检测肝组织中磷酸化Smad3连接区(linker-phosphorylated Smad3)和纤溶酶原激活物抑制剂-1(plasminogen activator inhibitor 1,PAI-1)蛋白的表达。方法♂ SD 大鼠50只随机分为DEN 组和正常对照组, DEN组给予0畅2%DEN溶液灌胃,每周5次至14周。对照组给予溶媒。分别于4、8、12、16周结束时处死动物。进行肝组织苏木精-伊红(HE)染色和Van Gieson(VG)胶原纤维染色；分别采用免疫组化法和Western blot 法检测肝组织中pSmad3L及PAI-1蛋白的表达。结果对照组肝组织结构正常,DEN组4周时,肝细胞点状坏死及炎性细胞浸润；8周时,肝细胞严重脂肪变性、灶性坏死,门管区出现纤维组织增生；12周时,增生的胶原束包绕并分割肝小叶,正常的肝小叶结构被破坏,假小叶形成；到16周结束时,剩余存活大鼠均形成肝癌,肝癌细胞排列成条索状或团块状,异型性明显。免疫组化结果显示,pSmad3L和PAI-1在正常肝组织中几乎无表达,DEN组4周时肝组织中有少量阳性表达,8周和12周表达量逐渐增强,到16周时达到高峰,尤其是在肿%10.3969/j.issn.1001-1978.2012.10.015