雾化吸入灭活草分枝杆菌对哮喘模型小鼠T-bet/GATA-3表达的影响

摘要

目的 探讨雾化吸入灭活草分枝杆菌对哮喘小鼠T-bet/GATA-3表达的影响,了解草分枝杆菌的免疫调节机制.方法 将24只♂Balb/c小鼠随机分为正常组、哮喘组、治疗组.模型组用鸡卵清蛋白(OVA)致敏激发制备哮喘小鼠模型,治疗组在OVA激发后雾化吸入灭活草分枝杆菌5 d,每日1次.各组小鼠处死后,取肺组织和支气管肺泡灌洗液(BALF),左肺组织病理切片行HE染色和过碘酸-雪夫染色(PAS染色),观察小鼠肺内炎症改变;ELISA法检测BALF中IFN-γ和IL-4水平;实时荧光定量PCR检测肺组织中T-bet、GATA-3 mRNA表达水平;流式细胞术检测肺单个核细胞Th1、Th2细胞占CD4+T细胞百分比.结果 肺组织HE染色发现,与哮喘组相比,治疗组支气管周围炎症细胞浸润减少,PAS染色发现治疗组管腔中杯状细胞较哮喘组明显减少;哮喘组中IFN-γ、肺组织中T-bet mRNA表达水平和Th1细胞百分比与正常组相比明显降低(P<0.05),IL-4、GATA-3 mRNA表达水平和Th2细胞百分比较正常组明显升高(P<0.05);治疗组IFN-γ、肺组织中T-bet mRNA表达水平和Th1细胞百分比较哮喘组明显升高(P<0.05),IL-4、GATA-3 mRNA表达水平和Th2细胞百分比较哮喘组明显降低(P<0.05).相关性分析发现,小鼠肺组织中T-bet mRNA与Th1细胞百分比呈明显正相关(r=0.70,P<0.01),GATA-3 mR-NA与Th2细胞百分比呈明显正相关(r=0.76,P<0.01).结论 雾化吸入灭活草分枝杆菌可以减轻哮喘小鼠气道炎症,通过调节转录因子水平,增加T-bet mRNA,降低GATA-3 mRNA表达水平,进而抑制Th2细胞因子分泌.